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如何檢測(cè)食品中農(nóng)藥殘留量，上海旦鼎貿(mào)易有限公司為大家介紹的食品中農(nóng)藥殘留量檢測(cè)的方法是酶抑制率法，或叫做分光光度法。

原理

在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)在412nm處測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。

試劑

pH8.0緩沖溶液：分別取11.9g無(wú)水磷酸氫二鉀與3.2g磷酸二氫鉀，用1000mL蒸餾水溶解。 

顯色劑：分別取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氫鈉，用20mL緩沖溶液溶解，4℃冰箱中保存。 

底物：取25.0mg硫代乙酰膽堿，加3.0mL蒸餾水溶解，搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩１４嫫诓?過(guò)兩周。 

乙酰膽堿酯酶：根據(jù)酶的活性情況，用緩沖溶液溶解，3 min的吸光度變化值應(yīng)控制在0.3以上。搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆茫４嫫诓?過(guò)四天。 

可選用由以上試劑制備的試劑盒。乙酰膽堿酯酶的值應(yīng)控制在0.3以上。

儀器

分光光度計(jì)或相應(yīng)測(cè)定儀（上海旦鼎農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀）。 

常量天平。 

恒溫水浴或恒溫箱。

操作步驟

樣品處理：選取有代表性的蔬菜樣品，沖洗掉表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，取樣品1g，放入燒杯或提取瓶中，加入5mL緩沖溶液，振蕩1 min ~2min，倒出提取液，靜置3 min ~5min，待用。 

對(duì)照溶液測(cè)試：先于試管中加入2.5mL緩沖溶液，再加入0.lmL酶液、0.1mL顯色劑，搖勻后于37℃放置15min以上（每批樣品的控制時(shí)間應(yīng)一致）。加入0.lmL底物搖勻，此時(shí)檢液開始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即放入儀器比色池中，記錄反應(yīng)3 min的吸光度變化值。 

樣品溶液測(cè)試：先于試管中加入2.5mL樣品提取液，其它操作與對(duì)照溶液測(cè)試相同，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值。  

結(jié)果判定

結(jié)果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。

當(dāng)蔬菜樣品提取液對(duì)酶的抑制率≥50%時(shí)，表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在，樣品為陽(yáng)性結(jié)果。陽(yáng)性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn)2次以上。

對(duì)陽(yáng)性結(jié)果的樣品，可用其它方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。